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熒光顯微鏡和普通顯微鏡的區(qū)別以及標(biāo)本制作要求

更新時(shí)間:2020-12-31      點(diǎn)擊次數(shù):4674
熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別:
1.照明方式通常為落射式,即光源通過物鏡投射于樣品上;
2.有兩個(gè)特殊的濾光片,光源前的用以濾除可見光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護(hù)人眼。
熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種,主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同 
標(biāo)本制作要求
1、載玻片
載玻片厚度應(yīng)在0.8~1.2mm之間,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔,厚度均勻,無明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。
2、蓋玻片
蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光 ,也可用干涉蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起到不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過,而反射激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光可激發(fā)標(biāo)本。
3、標(biāo)本
組織切片或其他標(biāo)本不能太厚,若太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外,細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋,影響判斷。
4、封裱劑
封裱劑常用甘油,必須無自發(fā)熒光,無色透明,熒光的亮度在pH8.5~9.5時(shí)較亮,不易很快褪去 。
5、鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油,使用特制的無熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。
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